Principales
Resultados
Cambios durante el desarrollo de la inmunoreactividad para la calretinina en la médula espinal de la lamprea.
Viloria A, Rodríguez-Alonso M, Costas V, Pérez-Fernández J, Pombal MA, Megías M.
Brain Res Bull. 2008. 75(2-4):428-32.
Estudiamos la distribución de la inmunoreactividad para la calretinina (CR-ir) en los niveles rostrales e intermedios de la médula espinal de las lampreas, desde los periodos embrionarios hasta los adultos. La CR-ir se observó en primer lugar durante la eclosión en las motoneuronas y en las neuronas sensoriales primarias de la médula espinal, las células dorsales. Durante el periodo prolarvario aparecen dos tipos celulares que muestran CR-ir: las células ganglionares y las interneuronas. Las motoneuronas, las células dorsales y las células ganglionares fueron fuertemente positivas, mientras que las interneuronas se tiñeron débilmente en las prolarvas tardías. La intensidad de CR-ir en estos cuatro tipos celulares cambió durante el periodo larvario. Se encontró un aumento de CR-ir en las interneuronas pero una disminución en las células dorsales y en las ganglionares. Estos cambios fueron más evidentes en las larvas premetamórficas. Las lampreas postmetamórficas prácticamente no presentaron CR-ir en las células dorsales. En las lampreas adultas las interneuronas mostraron la mayor intensidad de CR-ir, mientras que las motoneuronas se tiñeron más débilmente que en periodos anteriores del desarrollo. Además, las células dorsales y ganglionares de los animales adultos no mostraron CR-ir. Este estudio pone de manifiesto cambios en CR-ir durante el desarrollo de la médula espinal en diferentes tipos de neuronas, algunas veces con variaciones contrarias. Esta plasticidad de la expresión de la calretinina pude indicar diferentes necesidades por parte de una serie de neuronas espinales de la lamprea en diferentes comportamientos motores durante su ciclo de vida.
Distribución de inmunoreactividad para la adrenomedulina en el cerebro de la lamprea adulta de mar.
Pombal MA, López JM, de Arriba Mdel C, González A, Megías M
Brain Res Bull. 2008. 75(2-4):261-5
La adrenomedulina (AM) es un neuropéptido ampliamente distribuido en los vertebrados. En los vertebrados mandibulados se ha localizado en distintas regiones del sistema nervioso central mediante antisueros contra la AM humana ya que esta molécula está bien conservada entre las diferentes especies. En este estudio analizamos la localización de inmunoreactividad para la AM en los cuerpos celulares y fibras en el cerebro de la lamprea de mar, Petromyzon marinus, mediante inmunocitoquímica. Varias poblaciones de células positivas para AM se encontraron en la placa basal del prosencéfalo secundario, siendo más numerosas en el hipotálamo, así como dos en el diencéfalo y una en el mesencéfalo. Además, dos poblaciones celulares se encontraron en el placa alar rombencefálica, una en la región ístmica y otra en el núcleo del tracto solitario. Las fibras inmunomarcadas se distribuyeron por todo el cerebro de la lamprea, pero fueron más abundantes en la placa basal. Particularmente interesante fue la inervación conspicua del estriado por fibras positivas para AM. Además, nuestros resultados indican que células y fibras positivas están presentes en el sistema hipotálamo-neurohipofisiario, sugiriendo que la AM lleva a cabo funciones importantes en el control de la función de la glándula pituitaria.
Desarrollo del epicardio en la lamprea apoya un origen evolutivo del epicadio de vertebrados desde un glomérulo externo pronefrítico ancestral
Pombal MA, Carmona R, Megías M, Ruiz A, Pérez-Pomares JM, Muñoz-Chápuli R.
Evol Dev. 2008. 10(2):210-216.
El epicardio el la capa más externa del corazón de los vertebrados. Tanto el epicardio embrionario como su mesénquima derivado son críticos para el desarrollo del corazón, ya que contribuyen a la vaculatura coronaria y modulan la proliferación del miocardio ventricular. El epicardio embrionario parte de una estructura extracardiaca, un tejido progenitor par denominado proepicardio que es una proliferación de células celómicas que se encuentran en el límite entre el hígado y el seno venoso. Las células del proepicardio se adhieren y se expanden por la superficie cardiaca dando lugar al epicardio. Los corazones de los invertebrados siempren carecen de epicardio y no se ha propuesto una hipótesis acerca del origen de este tejido y de su progenitor epicárdico en los vertebrados. Nosotros describimos el desarrollo del epicardio en un representante del linaje más basal de los vertebrados, el agnato Petromyzon marinus (lamprea). El epicardio en las lampreas se desarrolla por migración de células celómicas agrupadas en una estructura par localizada en el techo de la cavidad celómica, entre el pronefros y el tubo digestivo. Más tarde, estas protusiones se diferencian en el glomérulo externo pronefrítico (PEG), una estructura compuesta por una red capilar, células mesangiales y podocitos. Esta observación es consistente con la conclusión de que el primordio del par más anterior del PEG en los agnatos se ha retenido y transformado en el proepicardio en gnatóstomos. Las células progenitoras glomerulares son muy vasculogénicas y probablamente permiten la vascularización del tubo cardiaco, inicialmente libre de vasos coronarios. Esta nueva hipótesis explica la sorprendente expresión de Wt1 y Pod1 en el epicardio, dos factores de transcripción esenciales para el desarrollo del sistema excretor.
Conexiones aferentes del techo óptico en las lampreas: un estudio experimental.
de Arriba MA, Pombal MA
Brain Behav Evol 2007. 69(1):37-68
Se estudiaron las aferencias tectales en animales adultos de tres especies de lamprea (Ichthyomyzon unicuspis, Lampetra fluviatilis, and Petromyzon marinus) mediante la inyección unilateral de BDA en el techo óptico (TO). Las neuronas del prosencéfalo secundario que proyectan al TO se localizaron en el palium, el lóbulo subhipocampal, el estriado, el áreal preóptica y el hipotálamo. Tras inyecciones en el TO se encontraron neuronas marcadas retrógrada y bilateralmente en: eminencia pretalámica, núcleo geniculado ventral, núcleo pretalámico periventricular, núcleo pretectal periventricular, núcleo precomisural, núcleos parvocelular y magnocelular de la comisura posterior y núcleo del tubérculo posterior; e ipsilateralmente en: núcleo de Bellonci, núcleo periventricular talámico, núcleo del tubérculo posterior y en el tegmento subpretectal, así como en el órgano pineal. En los niveles mesencefálicos se observaron neuronas marcadas retrógradamente en el torus semicircularis, el TO contralateral y bilateralmente en la formación reticular mesencefálica y dentro de los límites de los núcleos retinopetales. En el cerebro posterior (rombencéfalo) se observaron células que proyectaron bilateralmente al TO en los núcleos ítsmicos lateral y dorsal, el área octavolateral, el núcleo sensorial del tracto descendente del trigémino, el núcleo de la columna dorsal y la formación reticular. En la médula espinal rostral también aparecieron unas pocas células marcadas. Estos resultados ponen de manifiesto un patrón complejo de conexiones en el TO de la lamprea, la mayoría de las cuales también se han encontrado en otros vertebrados. Además, el TO de la lamprea recibe un gran número de aferencias no visuales desde todas las áreas más importantes de encéfalo y, por tanto, está involucrado en el procesamiento de información somatosensorial de diferentes modalidades.
Expresión plástica del gen Lhx15 (homeodominio-LIM) durante el desarrollo del encéfalo de la lamprea de mar (Petromyzon marinus).
Osorio J, Megías M, Pombal MA, Retaux S
Gene Expr Patterns 2006. 6(8):873-878
Los genes homeodominio-LIM codifican para una familia de factores de transcripción con funciones muy conservadas en la estructuración y regionalización del cerebro de los vertebrados. La expresión de uno de estos genes, Lhx15, en el encéfalo embrionario de la lamprea, delimita subdivisiones funcionales específicas. Para analizar el desarrollo no embrionario del encéfalo de la lamprea elegimos este gen para llevar a cabo hibridaciones in situ en larvas de Petromyzon marinus en diferentes estados de desarrollo. Demostramos la utilidad del Lhx15 para seguir el desarrollo y morfogénesis de estructuras encefálicas y mostrar la expresión plástica de este gen en el tiempo. Además, aportamos evidencias de la conservación evolutiva de la expresión de este gen en la médula espinal, notocorda y sistema urogenital.
Distribución de la inmunorreactividad para el neuropéptido FF en el sistema nervioso central de la lamprea y su relación con estructuras neuronales catecolaminérgicas.
Pombal MA, Lopez JM, de Arriba MC, Megías M, González A
Peptides 2006. 27(5):1054-1072
El neuropéptido FF (NPFF) es un octapéptido de los péptidos relacionados con los RF-amida, que fue inicialmente aislado del cerebro bovino. Su distribución en el sistema nerviso central se ha demostrado en varias especies de mamíferos, así como en algunos anfibios. Para conocer mejor la evolución de los patrones de expresión de este neuropéptido en vertebrados, realizamos un estudio inmunocitoquímico en la lamprea de mar, Petromyzon marinus. La distribución de las estructuras inmunorreactivas para NPFF (NPFF-ir) en el cerebro de la lamprea es, en general, comparable a la descrita previamente en otras especies de vertebrados. En la lamprea, la mayoría de las células NPFF-ir se encontraron en el hipotálamo, particularmente en dos grandes poblaciones, el núcleo cama del tracto de la comisura postóptica y el área tuberomamilar. Se observan también numerosas células NPFF-ir en el telencéfalo rostral, incluyendo una población en la sustancia gris del itsmo dorsal y la formación reticular. Neuronas marcadas adicionales se encontraron dentro de la región preóptica, la vesícula parapineal, el tegmentum mesencefálico periventricular, el tracto del trigémino descendente, el núcleo del tracto solitario, así como en la sustancia gris de la médula espinal. Las fibras NPFF-ir se distribuyen ampliamente en el encéfalo y en la médula espinal, siendo, en general, más abundantes en la placa basal. La presencia de las fibras NPFF-ir en la neurohipófisis de la lamprea sugieren que los neuropétidos NPFF en el sistema hipotálamo-hipófisiario habrían emergido al inicio de la evolución.
Cambios durante el desarrollo de las fibras inmunorreactivas para el GABA en la médula espinal de la lamprea.
Pombal MA, Ruiz Y, Rodríguez-Alonso M, de Arriba MC, Costas V, Alvarez R, Megías M
Brain Res Bull. 2005. 66:371-375
Usando técnicas inmunocitoquímicas se han estudiado los cambios en la distribución y número de las fibras inmunorreactivas para el GABA (GABA-ir) desde los estados postembrionarios hasta los adultos en la sustancia blanca de la médula espinal. Desde prolarvas hasta individuos reproductores hubo un incremento del número de fibras GABA-ir. Se pueden distinguir tres fases: a) desde prolarvas hasta larvas de tamaño medio (sobre 50 mm de longitud corporal) se observa un aumento del número de fibras GABA-ir por sección. Además, en esta fase se establece un patrón de distribución de estas fibras similar a la encontrada en individuos adultos; b) en esta fase el número de fibras GABA-ir se mantiene inalterado hasta la metamorfosis, el final del estado larvario; c) finalmente, en jóvenes postmetamórficos y animales adultos el número de fibras GABA-ir es mayor que en las larvas. Estas observaciones, unidas al cambio previamente publicado en las neuronas GABA-ir, indica que, al menos, parte del componente inhibidor GABA del circuito locomotor se reorganiza durante el ciclo de vida de la lamprea e indicaría que se necesitan diferentes condiciones de inhibición en dicho circuito.
Neuronas inmunorreactivas para la colina acetil-transferasa en la retina de lampreas adulta y en desarrollo
Pombal MA, Abalo XM, Rodicio MC, Anadón R, González A.
Brain Res. 2004. 993:154-163
Se muestra por primera vez la presencia de célula amacrinas inmunorreactivas para la colina acetil-transferasa (ChAT-ir) en la retina de tres especies de lamprea (Lampetra fluviatilis, Ichthyomyzon unicuspis, and Petromyzon marinus). En las tres especies, las células ChAT-ir se distribuyen principalmente en la capa plexiforme interna, que en lampreas se extiende desde la capa nuclear interna hasta la membrana limitante interna. Estas células tienen una forma bipolar, triangular o estrellada, y dan a prolongaciones que se extienden en la capa plexiforme interna. En lampreas postmetamórficas las prolongaciones ChAT-ir dan a dos subplexos asimétricos, uno interno y otro externo, en la capa plexiforme interna, lo que es reminescente de la distribución de prolongaciones ChAT-ir en las subláminas ON y Off encontradas en vertebrados mandibulados. La retina de larvas carece de inmunorreactividad para ChAT, y las prolongaciones y células ChAT-ir aparecen durante la metamorfosis temprana en la retina, mostrando en los últimos estados metamórficos una organización similar a la encontrada en adultos. Esta primera publicación de células ChAT-ir en la retina de lampreas indica que la aparición de los circuitos colinérgicos en la retina de vertebrados sucedió antes de la divergencia de las líneas de agnatos y gnatóstomos.
Desarrollo de las células inmunorreactivas para GABA en la médula espinal de la lamprea de mar, P. marinus
Ruiz Y, Viloria A, Pombal MA, Megías M
Journal of Comparative Neurology. 2004. 470:151-163
La médula espinal de la lamprea de mar aumenta en longitud y tamaño durante todo su ciclo de vida y así, es esperable que se añadan neuronas nuevas. Esto implicaría que el circuito locomotor debe estar en continua remodelación. Un elemento clave en el funcionamiento del circuito locomotor espinal son las neuronas inhibidoras que expresan GABA. Aquí estudiamos la inmunorreactividad para GABA en la médula espinal de la lamprea durante su desarrollo postembrionario. Se encontraron tres poblaciones neuronales positivas en función de su distribución: localizadas en la sustancia gris, contactando con el líquido cerebroespinal (células LC) y localizadas en la sustancia blanca. Los resultados muestran que: a) El número de neuronas GABA aumenta continuamente desde el periodo larvario hasta adultos; b) la densidad de neuronas GABA está entre 60 y 87 células/100 m, exceptuando el cominezo del periodo larvario y el de jóvenes postmetamórfios donde la densidad es de aproximadamente 100 células/100 m; c) las células de la sustancia gris y las células LC muestran distintas variaciones en sus densidades dependiendo del punto del desarrollo en que se encuentre el animal. Así, en las larvas de 10 mm las células localizadas en la sustancia gris son mucho más abuntes que las células LC, mientras que en postmetamórficos ocurre lo contrario. La mayoría de las neuronas localizadas en la sustancia blanca se identificaron como células del borde. Estas células aumentan su número desde el estado de prolarva hasta el de larvas de 50 mm, donde se alcazan unas 10 células del borde positivas por segmento. Este valor permanece hasta el estado adulto. Además, las células del borde postivas para GABA representan entre el 20 y el 30 % del total de células del borde. El aumento en el número de células positivas para GABA y el comportamiento específico de las tres poblaciones consideradas indicaría que en diferentes periodos de desarrollo de la médulas espinal de la lamprea se necesitaría un balance inhibidor específico.
La inmunorreacitividad para calbindina y calretinina identifican diferentes tipos de neuronas en la médula espinal de la lamprea adulta.
Megías M, Alvarez-Otero R, Pombal MA.
J Comp Neurol 2003 Jan 1;455(1):72-85
El centro generador de la locomoción de vertebrados se compone de diferentes poblaciones de neuronas espinales que generan el movimiento. En la médula espinal de la lamprea se han identificado distintas poblaciones basándose en criterios morfológicos y fisiológicos, y se han integrado en los circuitos neuronales implicados en la generación del movimiento. Sin embargo, la carencia de marcadores histoquímicos para la mayoría de las interneuronas hace difícil su estudio a lo largo de toda la médula espinal. Hemos investigado la inmunorreactividad con anticuerpos para calbindina y calretina en la médula de lampreas adultas. Se pudieron identificar varios tipos de neuronas: 1)neuronas fuertemente inmunorreactivas localizadas dorsomedialmente, 2) neuronas moderadamente inmunorreactivas localizadas lateralmente, 3) neuronas pequeñas débilmente inmunorreactivas, 4) neuronas ventromediales, 5) células que contactan con el líquido cefalorraquídeo, y 6) motoneuronas. El grupo ventromedial de neuronas positivas para calbindina también lo fue para serotonina, y así, representa el grupo de neuronas positivas para serotonina/dopamina previamente descrito. Algunas de las neuronas positivas localizas lateralmente pueden corresponder a las células CC (células con axones cruzados y caudales), puesto que son marcadas con trazadores depositados en el lado contralateral de la médula espinal. Otros tipos de neuronas bien caracterizados como las células dorsales, interneuronas laterales, las células del borde y las interneuronas gigantes son negativas tanto para calbindina como para calretinina. Así, calbinina y calretinina son marcadores útiles para el estudio de poblaciones neuronales que pueden ser integrados en el circuito locomotor.
Esquema que ilustra los distintos tipos de neuronas inmunorreactivas para calbindina y calretinina en la médula espinal de la lamprea de mar. Visión dorsal. SDM: neuronas fuertemente inmunorreactivas localizadas dorsomedialmente; ML: neuronas moderamente inmunorreactivas localizadas lateralmente; Sm: neuronas pequeñas débilmente inmunorreactivas; CC: células que contactan con el líquido cefalorraquídeo.
Localización inmunocitoquímica de calretinina en el sistema olfativo de la lamprea adulta, Lampetra fluviatilis.
Pombal MA, de Arriba MC, Sampedro C, Alvarez R, Megías M.
Brain Res Bull 2002 Feb-Mar 1;57(3-4):281-3
La distribución de estructuras inmunorreactivas para calretinina (CR-ir) en el sistema olfativo de la lamprea adulta (Lampetra fluviatilis) se estudió usando técnicas inmunocitoquímicas. En el epitelio olfativo, una subpoblación de receptores olfativos fue positivo para calretinina. En el bulbo olfativo, se observaron tres poblaciones diferentes. Células grandes CR-ir (células mitrales) que se localizaron medialmente a los glomérulos olfativos y ocasionalmente entre ellos. En la capa granular interna se encontraron dos tipos de células CR-ir: numerosas células pequeñas (céelulas granulares) y algunas de células CR-ir de tamaño medio (posibles células periglomerulares desplazadas). Además, aparecieron fibras con distintas intensidades de inmunorreactividad en algunos tractos axónicos de los nervios olfativos, así como en determinados glomérulos. La presencia de células y fibras CR-ir en todas las capas del bulbo olfativo de la lamprea apoya la idea de que esta proteína está presente in las vías que procesan la información sensorial a lo largo de la evolución.
Distribución de las estructuras immunoreactivas para la acetil colina transferasa en el cerebro de la lamprea.
Pombal MA, Marín O, González A.
J Comp Neurol 2001 Feb 26;431(1):105-26
La distribución de neuronas y fibras colinérgicas se estudió mediante técnicas inmunocitoquímicas en el cerebro de dos especies de lamprea (Petromyzon marinus and Lampetra fluviatilis) mediante el empleo de anticuerpos contra la acetil colina transferasa (ChAT). Los resultados obtenidos en ambas especies fueron similares, aunque se observaron algunas diferencias interespecíficas. En el cerebro anterior, las células colinérgicas estuvieron presentes en el estriado, la región preóptica, núcleo paraventricular, en los órganos pineal y parapineal, habénula, y en el pretecho. También mostraron una fuerte inmunorreactividad los nervios craneales de las motoneuronas (III, IV, V, VI, VII, IX, and X), el primero y el segundo de los nervios espino-occipiales (so), y el hasta ventral de la médula espinal. Además, se observaron otras neuronas positivas: en el núcleo mesencefálico M5 de Schober, dos poblaciones diferentes en la región ítsmica, en el componente eferente del nervio octavo, posibles células preganglionares parasimpáticas, células en el núclel del tracto solitario y en la formación reticular rombencefálica. Las fibras colinérgicas se distribuyeron ampliamente en el cerebro. La comparación con estudios previos en otros vertebrados sugiere que las vías colinérgicas principales, como la inervación tectal desde la región ítsmica, están también presentes en las lampreas. Particularmente interesante fue la prominente proyección a la neurohipófisis desde neuronas colinérgicas situadas en la región preóptica y en el núcleo paraventricular. Los presentes resultados se analizaron desde el punto de vista del modelo segmentario del cerebro, como previamente se ha hecho en otros vertebrados. Nuestros resultados muestran que la organización de muchos sistemas colinérgicos en la lamprea, como por ejemplo en el estriado y en las regiones ítsmica y preóptica, presentan características de los cerebros anamniotas que permanecen similares al resto de los amniotas estudiados hasta ahora, resultando un grado de conservación sorprendente. Por tanto, la distribución de estructuras inmunorreactividas para ChAT en el cerebro de la lamprea es, en general, comparable con la descrita para otras especies de vertebrados.
Mapa prosomérico del cerebro anterior de la lamprea basado en la inmunorreactividad pata calretinina, tinción de Nissl y otros marcadores secundarios.
Pombal MA, Puelles L.
J Comp Neurol 1999 Nov 22;414(3):391-422
La organización estructural del cerebro anterior extratelencefálico se reexamina desde el punto de vista del modelo prosomérico segmentario. La cuestión que se plantea es si el modelo prosomérico para el cerebro anterior empleado en Gnatóstomos es útil para interpretar subdivisiones en el cerebro anterior de la lamprea. Para este propósito se identificaron las principales divisiones reconocidas por el modelo prosomérico en otros vertebrados, tanto transversales como longitudinales, en secciones de lamprea teñidas con la técnica de Nissl. Se trazaron las líneas de las discontinuidades citoarquitectónicas y de los contornos de grupos neuronales migrados en una representación bidimensional y sagital, y también fueron clasificadas en función de su disposición radial. Los mapas de inmunorreactividad para calretinina en secciones adyacentes sirvieron para definir mejor determinadas unidades estructurales. Estos datos se complementaron con numerosas observaciones de otros marcadores secundarios, los cuales identificaron formaciones específicas, subdivisiones y límites adicionales. Se prestó especial atención a los estudios que indicaban si tales grupos neuronales definidos químicamente mostraron límites alineados con los límites intra o interprosoméricos postulados. Se estudió el trayecto de diversos tractos axónicos en función de su topografía prosomérica. Este análisis mostró que el modelo prosomérico completo se aplica directamente al cerebro anterior de la lamprea. Estos descubrimientos implican la existencia de una organización longitudinal y segmentaria del tubo neural primitivo común para todos los vertebrados. Un aspecto interesante nuevo aparece en la interpretación del pretecho de la lamprea, el tálamo ventral y dorsal, y el hipotálamo. También se examinó la continuidad topológica de las regiones prosoméricas del cerebro anterior con porciones evaginadas o no evaginadas.
Inmunorreactividad para calretinina en el sistema hipotálamo-neurohipófisis de la lamprea.
Pombal MA, Marín O, González A.
Eur J Morphol 1999 Apr;37(2-3):103-6
Se estudió la inervación colinérgica del sistema hipotálamo-neurohipófisis de la lamprea Petromyzon marinus y Lampetra fluviatilis mediante técnicas inmunocitoquímicas con anticuerpos dirigidos contra la enzima colina acetiltransferasa (ChAT). Los resultados obtenidos en ambas especies fueron básicamente similares. Se encontró un rica inervación de fibras inmunorreactivas para ChAT en la neurohipófisis. Estas fibras se originan en las células colinérgicas localizadas en la región preóptica y el núcleo paraventricular. Algunas de estas neuronas colinérgicas están en contacto con el líquido cefalorraquídeo. Fueron evidentes numerosos engrosamientos en la región tuberal de la lamprea de mar, pero no en la lamprea de río. Se discuten las posibles vías de liberación de acetilcolina en la hipófisis de la lamprea.
Elementos neuronales colinérgicos y GABAérgicos en el órgano pineal de la lamprea, observaciones sobre las conexiones diferenciales de las neuronas pinealofugales mediante trazadores.
Pombal MA, Yáñez J, Marín O, González A, Anadón R.
Cell Tissue Res 1999 Feb;295(2):215-23
Los elementos colinérgicos y GABAérgicos del órgano pineal de la lamprea fueron estudiados mediante inmunocitoquímica para la colina acetil transferasa (ChAT) y el ácido gamma-aminobutírico (GABA)y mediante histoquímica para la acetilcolinesterasa (AChE). Para realizar comparaciones se realizó inmunocitoquímica para la serotonina (5-HT) y experimentos con trazadores de los dos tipos de células de proyección, como son las ganglionares y los fotorreceptores de axones largos. La mayoría de los fotorreceptores fueron inmunorreactivos para ChAT y positivos para AChE, mientras que las células ganglionares y el tracto pineal fueron negativos para ChAT y sólo débilmente positivos para AChE o negativos. Estos resultados sugieren fuertemente la presencia de un sistema colinérgico de fotorreceptores en el órgano pineal de la lamprea. En el tallo pineal se observaron las fibras GABAérgicas que parecen originarse desde las células ganglionares teñidas débil o moderadamente. La inmunocitoquímica para 5-HT mostró la presencia de dos tipos de células 5-HT, células bipolares y células parecidas a las ganglionares. Las conexiones de las células ganglionres y las de los receptores de axones largos se estudiaron mediante la aplicación de de DiI en el tallo pineal de cerebros fijados o mediante aminodextranos biotinilados (BDA) en uno de las principales dianes de las fibras pinealofugales (el techo óptico o el tegmentum mesencefálico) de cerebros mantenidos in vitro. Algunos de las células ganglionares y de los receptores de axones largos fueron teñidas desde el techo óptico. Sin embargo, la aplicación de BDA en el tegmentum marcó exclusivamente células ganglionares en el órgano pineal. estos resultados indican que los dos tipos morfológicos de neuronas pineales aferentes tienen distintas proyecciones. No se observaron células marcadas en el órgano parapineal en los experimentos con la BDA, indicando que este órgano y el órgano pineal están involucrados en circuitos neuronales diferentes.
Conexiones aferentes y eferentes del órgano parapineal de la lamprea: un estudio inmunocitoquímico y con trazadores.
Yáñez J, Pombal MA, Anadón R.
J Comp Neurol 1999 Jan 11;403(2):171-89
Las conexiones nerviosas del órgano parapineal de dos especies de lampreas fueron estudiadas con el fluorescente perclorato de 1,1'-dioctadecyl-3,3,3'3'-tetramethylindocarbocyanine (DiI) y con inmunocitoquímica. El órgano parapineal de la lamprea consiste de una vesícula y de un ganglio que están conectados con la habénula izquierda. Los experimentos de marcaje incluyeron la aplicación de DiI en el órgano parapineal, en el fascículo retroflejo izquierdo y derecho, en la habénula izquierda, y en la región pretectal izquierda. Las fibras parapineales aferentes se encontraron en el fascículo retroflejo izquierdo viajando hacia el núcleo interpeduncular. Las fibras parapineales de este fascículo patieron de las células ganglionares parapineales, mientras que la aplicación de DiI en la habénula izquierda marcó tanto a las neuronas ganglionares como a las células bipolares de la vesícula parapineal. Las neuronas eferentes fueron observadas en la habenula izquierda, y bilateralmente en el núcleo subhipocampal y en el pretecho dorsal. El marcaje con DiI también reveló una proyección hipocampal. El estudio inmunocitoqímico de la vesícula parapineal puso de manifiesto células inmunorreactivas para serotonin en ambas especies de lamprea, así como células inmunorreactivas para la sustancia P (SP-ir) en la lamprea de mar y células inmunorreactivas para la colina acetil transferasa (ChAT-ir) en la lamprea de río. Las células SP-ir y las ChAT-ir formaron un rico neuropilo en el ganglio parapineal. Las células Calretinina-ir fueron numerosas en el ganglio. Las fibras aferentes Neuropeptido Y-ir y las GABA-ir fueron observadas en el órgano parapineal. Las fibras Neuropeptido Y-ir se originan en el núcleo subhipocampal, mientras que las fibras GABA-ir pudieron también presentarse en el núcleo pretectal. Algunas fibras galanina-ir fueron observadas. Estos resultados indican que las conexiones parapineales son totalmente diferentes de las del órgano pineal. Se discute la posible homología entre los órganos parapineales de vertebrados.
Neuronas internucleares del sistema oculomotor en la larva de la lamprea del mar.
González MJ, Pombal MA, Rodicio MC, Anadón R.
J Comp Neurol 1998 Nov 9;401(1):1-15
Las neuronas internucleares del sistema oculomotor de las lampreas se han caracterizado aquí por primera vez. La aplicación de peroxidasa del rábano (HRP), fluoresceina, o Texas red-(TRDA) en el núcleo oculomotor de la larva de la lamprea (Petromyzon marinus) marcó retrógradamente dos poblaciones de interneuronas contralaterales del abducens, una lateral y la otra periventricular. La aplicación del trazador en el núcleo abducens marcó anterógradamente las fibras contralaterales gruesas que contactan específicamente con el subnúcleo rectus motor medial mediante botones grandes. La aplicación local de TRDA en este subnúcleo permitió la identificación de las interneuronas laterales del abducens como el origen de esta proyección. Con microscopía electrónica en el subnúcleo rectus motor medial se encontraron botones grandes con vesículas sinápticas redondeadas, que contactaron con los cuerpos celulares, así como botones pequeños con vesículas pleomórficas. Esta proyección internuclear rectus lateral (abducens) -- rectus medial (oculomotor) de las lampreas parece ser similar a aquellas implicadas en la coordinación de los movimientos horizontales del ojo en mamíferos. Las interneuronas periventriculares del abducens proyectaron bilateralmente a otros subnúcleos oculomotores. La aplicación de trazador en el núcleo abducens marcó un grupo de interneurons pequeñas en el subnúcleo rectus motor dorsal ipsilateral. El marcaje anterógrado indica que los interneuronas oculomotoras proyectan ipsilateralmente al subnúcleo abducens rectus ventral, correspondiendo así a las interneuronas del oculomotor encontrados en los mamíferos y en las ranas. Las interneuronas de los subnúcleos rectus motores ventral y dorsal están probablemente implicados en el control de los movimientos conjugados verticales del ojo. Los actuales resultados sugieren fuertemente que la coordinación internuclear de los movimientos conjugados del ojo apareció en los vertebrados más tempranos. Las homologías de los músculos extraoculares de las lampreas y los Gnatóstomos se han reexaminado.
Otras publicaciones:
Mapa prosomérico de encéfalo anterior de la lamprea basado en la inmunorreactividad para la calretinina, tinció de Nissl y otros marcadores complementarios.
Pombal MA, Puelles L
J Comp Neurol. 1999 Nov 22;414(3):391-422.
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